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二抗

二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体,上面通常连有酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛,如蛋白质印记(WB),酶联免疫吸附(ELISA),免疫组织化学(IHC),免疫细胞化学(ICC),流式细胞术(FC)及免疫沉淀(IP)。二抗针对某一特定物种的所有抗体均具有特异性,因而使用标记的二抗可以去对每一个一抗进行标记,大大节省了时间和费用;此外,一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子,从而使信号大大增强,提高了实验灵敏度。

华美生物二抗具有反应种属广、作用效果强和标记丰富等特点,可应用于IF、FC、ELISA、WB、IHC和ICC等实验类型。

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引用文献

Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) Antibody;HRP-conjugated referenced in "Removal of Copper in Microdroplets by Ovomucoid Hydrolysates Bound to Reverse-Phase Chromatography Media Within Pipette Tips" Applied Biochemistry and Biotechnology, 2019

Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) Antibody;HRP-conjugated referenced in "microRNA-98 inhibits the proliferation, invasion, migration and promotes apoptosis of breast cancer cells by binding to HMGA2" Bioscience Reports, 2018

Rabbit anti-Human IgG Fc Antibody;HRP conjugated referenced in "Hyaluronic acid-endostatin2-alft1 (HA-ES2-AF) nanoparticle-like conjugate for the target treatment of diseases" Journal of Controlled Release, 2018

Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) Antibody;HRP conjugated referenced in "Effects of microRNA-10a on synapse remodeling in hippocampal neurons and neuronal cell proliferation and apoptosis through the BDNF-TrkB signaling pathway in a rat model of Alzheimer's disease" J Cell Physiol, 2017

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关于二抗

检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,其中如何根据一抗的种属来源和类型选择二抗尤为重要。这里汇总了一些选择的要点:

  • 一抗的种属来源

    二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗;如果一抗是从兔血清里制备的兔多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。

  • 一抗是属于哪个类或亚类

    除了要与一抗的种属来源相一致,二抗还需与一抗的类别或亚类相匹配,这通常是针对单克隆抗体而言。一般来说多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。而单克隆抗体则相对复杂些,由于单克隆抗体有不同的类别和亚型,因此相应的二抗也需要根据这些亚型进行选择。

  • 二抗的种属来源

    一般来说,不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系,来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别。但是在一些特殊的实验里,如双标实验里,如果其中一个一抗是山羊来源的,一个是小鼠来源的,则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗,这时候,二抗就不能选择山羊或者小鼠来源的。。

  • 选择哪种形式的二抗

    是整个IgG分子,F(ab')2片段,还是Fab片段?

    整个IgG分子:此种抗体适用于多数情况。

    F(ab')2片段:该种抗体是由两个靠二硫键连接的用于结合抗原的Fab片段组成, 这些抗体用在特定的情况中,如需要避免抗体与具有Fc受体的细胞结合的情况。

    Fab片段:它们只有一个结合位点,一般用来封闭内源性免疫球蛋白。